锐谈 「 ACS SYNTH BIOL:生物传感器酶工程技术在阿洛酮糖生物合成的应用
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- 作者:Z
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- 发布时间:2023-09-18 16:16
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来自巴黎萨克雷大学的Ioana Grigoras团队在Synthetic Biology上发表了名为“Biosensor-based enzyme engineering approach applied to psicose biosynthesis”的文章。该文章开拓了一种基于生物传感器的酶筛选主意。
D-阿洛酮糖生物合成主要采用D-塔格糖-3-异构酶和D-阿洛酮糖-3-异构酶。此刻报道了许多出处的DPEase和DTEase,如慈鲷假单胞菌、根癌农杆菌和纤维素溶化梭状芽胞杆菌。
这些酶没关系成为物业生物催化的良好候选酶,是纤维素梭菌的DPEase的热平稳性,但它们表现出较低的酶活性,导致而今所有物业应用高贵。
作者选用根瘤菌中的转录因子PsiR。这是一个预测的LacI家族转录因子,证明PsiR能够连系启动子区域的整齐序列,并在别国D-阿洛酮糖的情况下阻止受调控启动子的转录。PsiR当然存在于差别的根瘤菌种中。
作者以mCherry为报告基因,来自分歧菌种的PsiR及启动子组合成七种分歧的D-阿洛酮糖生物传感器。然后,作者对每个生物传感器进行了荧光强度试验,包孕荧光的本原表达和反响畛域,以评估哪一种更适合筛选DPEase。选定来自A. tumefaciens中的转录因子的生物传感器。
原文链接:https://academic.oup.com/synbio/article/4/1/ysz028/5650417?login=false
作者:Z