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【概要描述】 外部控制基因表达的能力转换了所有生物研究领域的范式，是合成生物学。这种控制产生在转录和翻译水平上，而能够在DNA拷贝水平上进行控制的技术受到以下限制：

1)依赖于少数具有固定和任意拷贝数的质粒；

2)需要多个质粒进行复制控制；

3)仅限于特殊菌株。



战胜这些限制，考究者提出了TULIP： 一种具有可诱导拷贝数控制功能的独立质粒，目的是在各样常用于克隆、卵白质表达和代谢工程的大肠杆菌菌株之间兑现可移植。

这项考究成绩“Inducible plasmid copy number control for synthetic biology in commonly used E. coli strains”发表2,02211月的自然子刊 Nature communications。


验证使用PCN控制基因表达的潜力，设计了一个可主动调节控制的质粒。




RepAv7和可诱导的CymRAM按捺性TF被置于PCymRC启动子下的多克隆配置中，PCN被单体形势的RepAv7上调。而通过二聚体形势的负反馈被灵验排除。

相反，PCN的下调现在是通过CymRAM实现的。

这种效应可以通过Cuminic acid调节：插手Cuminic acid后，CymRAM对RepAv7的按捺被解除，发作前者的大表达，导致质粒复制增加。RepAv7的正效应被CymRAM对RepAv7表达的负效应所平衡，达到了平衡。



研究者在四种常用的大肠杆菌菌株，包括质粒克隆、卵白质表达、代谢工程和微生物学模型菌株，以及NEBSable，结果验证了TULIP可能成功的在广泛的大肠杆菌菌株中进行灵活的PCN控制。





查究者通过TULIP裁汰对克隆和转化的依赖性、TULIP可在分歧背景下一再使用模块等多个应用实例说明TULIP没关系兑现动态的PCN控制，不光没关系加速基因电路的设计和优化，没关系促进模块在分歧遗传背景下的菌株进行设计和使用。



原文来历：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC9637173/

作者：M

• 分类： 新闻动态
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• 发布时间：2023-02-03 09:19
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